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簡要描述：小麥胚芽凝集素，AF488標記是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合的凝集素，是綠色熒光中最亮的WGA綴合物。WGA與糖綴合物結(jié)合，其衍生物和綴合物被廣泛用于標記細胞膜和纖維化瘢痕組織，用于熒光成像和分析。
產(chǎn)品型號：AC15L012廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時間：2024-08-07訪 問 量：1667產(chǎn)品分類
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| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC15L012 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1 mg | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
小麥胚芽凝集素，AF488標記（下文簡稱“AF488 WAG"），是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合的凝集素，是綠色熒光中最亮的WGA綴合物。WGA與糖綴合物結(jié)合，其衍生物和綴合物被廣泛用于標記細胞膜和纖維化瘢痕組織，用于熒光成像和分析。WGA的糖結(jié)合特異性與β-1,4-GlcNAc-連接殘基的序列，即幾丁質(zhì)酶有關(guān)。每個單體包含兩個相同的非相互作用的結(jié)合位點，它們與3或4β-1,4-GlcNAc單元互補。在所檢測的單糖中，只有GlcNAc與WGA結(jié)合。甘露聚糖不結(jié)合，而GalNAc只能弱結(jié)合。WGA與含有Galβ（1--4）GlcNAcβ（1--3）重復序列（即聚乳糖胺型聚糖）的大寡糖中的內(nèi)部GlcNAc殘基具有高親和力結(jié)合。N-乙酰神經(jīng)氨酸只參與與WGA的低親和力相互作用。WGA表現(xiàn)出了豐富的糖類特異性結(jié)合模式，可用于復雜碳水化合物的結(jié)構(gòu)分析。
訂購信息
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
| 小麥胚芽凝集素，AF488標記 | AC15L012 | 1 mg | 1580 |
運輸與保存
藍冰運輸。4℃短期避光保存，有效期3個月；-15℃長期避光保存，有效期12個月。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| 激發(fā)： | FITC濾波片 |
| 發(fā)射： | FITC濾波片 |
| 推薦孔板： | 黑色透明 |
使用方法
溶液配制
AF488 WAG儲備溶液 (200X)配制
將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲備溶液。
【注】：重新配制的儲備溶液可在 4℃ 下短期儲存，或在 -20℃ 下長期儲存。
AF488 WAG工作溶液 (1X)配制
（1）將 5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。
【注】：不同細胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同?；罴毎耐扑]起始濃度為 5-10 µg/mL。
操作步驟
活細胞染色
用 HHBS 緩沖液清洗細胞2次。
添加 100 µL AF488 WAG工作溶液。
將細胞與AF488 WAG工作溶液在 37℃ 下孵育 10-30 min。
用 HHBS 緩沖液清洗細胞2次。
使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。
固定細胞染色
在PBS中使用4％的甲醛固定細胞。【注】：對于固定細胞膜染色，建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導致細胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。
添加 100 µL AF488 WAG工作溶液。
在室溫下用AF488 WAG工作溶液孵育細胞 10-30 min。
用 HHBS 緩沖液清洗細胞2次。
使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。
圖示
圖 1.
使用AF488 WAG以 5 µg/mL的濃度在活細胞（Hela細胞） 染色 30 min，然后用Hoechst 33342 *超級純*（貨號：AC12L021）染色。最后使用帶FITC和DAPI濾波片組的熒光顯微鏡成像。
注意事項
本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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Hoechst 33258 *超級純*（貨號：AC12L011 ）
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